CASY VIVO セルカウンター&アナライザー

CASY VIVO セルカウンター＆アナライザーは、様々な細胞の細胞数をカウントするための理想的なパートナーです。大きな幹細胞の凝集体から小さな酵母やバクテリアまで、様々なサイズの細胞に対応しています。CASYは正確かつ再現性が高く、サンプルの前処理は不要で、簡単に使用できます。迅速かつ低コストに細胞をカウントし、透明性のある結果とGMP/GLPに準拠した品質が得られます。

• 最高の再現性と精度を実現
• サンプル調製不要で、簡単なオペレーション
• 低ランニングコストで迅速な測定
• 透明性の高い結果と品質管理
• 数千件の論文発表と導入実績
• GMP/GLPに準拠
• 21CFR Part 11モジュール（オプション）

CASYは、キャピラリーで区切られた2本の電極間の導電率を測定します。細胞は、専用バッファーであるCASYtonに懸濁されます。測定中、キャピラリーを通過する細胞は電気パルスを発生します。パルスのの強度は細胞の体積と直接相関しているため、キャピラリーを通過する各細胞の体積を検出することができます。

私たちは、GMP/GLP水準をを必要とする何百というお客様に対して、定期的に最大±2%以下の測定誤差を保証しています。

凝集体の体積にも同様に、±2%の精度で測定します。凝集体を無視するか、あるいは凝集体のコントラストが低い画像にリングを描こうとする光学測定とは異なり、CASYは数学的に信頼のおける体積に基づいた凝集補正を行い、検出された各凝集体に何個のシングル細胞が収まるかを見ます。平均体積とサイズの情報により、例えばiPS細胞において、凝集度合いの変化に気づくことすら可能です。

CASYにより、幅広い細胞濃度において正確かつ再現性のある結果が得られます。唯一の限界は統計的有意性です。つまり、300個の細胞を測定する場合、1回の測定で1,000個以上、あるいは10,000個の細胞を数えるときと比較して、誤差と標準偏差はより高くなります。しかし非常に低濃度の細胞であっても、希少性が高い細胞であったり量が限られていたりする場合には、測定液量を最大3.6mlまで増やすだけで結果を改善することができます。

上図はケラチノサイトを6回測定し、その結果を比較したものです。結果を数値で見る前であっても、サイズ分布グラフを重ね合わせることで、再現性の高さがわかります。このようにCASYは、ユーザーや場所に依存しない高い再現性を持つため、バイオテクノロジーや製薬分野において、特に異なる拠点で作業を繰り返すに最適な装置です。

再現性のある研究において重要な要素を知るために、高い評価を受けている論文を分析した結果、5つの主要な柱があることがわかりました。

• 精密なカウントによる正確な基準の確保

客観的な手法で細胞密度を測定してからすべての実験を始めることで、播種のばらつきを排除します。特に、CRISPRスクリーニングのように異なる細胞種を同時に扱う場合に重要となります。

• 精確な生存率測定による整合性チェック

現在のゴールドスタンダードはフローサイトメトリーですが、本製品のラベルフリーな細胞膜完全性評価技術を活用することにより、同等の結果をより簡単に得ることができます。

また染色を用いた測定法において発生する人為的な誤差や検出漏れを回避することも可能です。

• 体積分析による形態学的な変化の検出

高解像度の3次元体積（フェムトリットル (fL) 単位）測定により、受容体などの表面マーカーが発現する何時間も前に、細胞の活性化や休止状態といった表現型の変化を検出します。

• 厳格な正規化による科学的な基準の確立

代謝や機能の測定値を絶対的な細胞体積や細胞数で標準化することにより、生データを生理学的な真実へと変換します。これにより、実験間で、IC50や分泌データの比較が可能となります。

• 標準化による再現性というゴールの達成

作業工程から目視による推測という主観的なステップを排除することで、異なる研究施設間や、異なる実験操作者間でのプロトコルを統一できます。これらの柱が揃うことで、実験から論文発表までの道のりを短縮することができます。

画像ベースの細胞計数技術には、測定誤差が増えてしまういくつかの原因があります。

1. サンプル調製（染色や単離）のためにサンプルを操作することが必須であり、細胞の品質や数に影響を与えます。また測定用スライドに細胞を分注する際において、細胞の分散は毛細管現象により細胞の大きさに依存することになります。凝集体は分散するのが最も遅くなり、よってスライド上に細胞を均一に分散することは困難です。
2. 撮影できる面積が限られているため、分析できる細胞数も少なくなります。これにより、統計的な妥当性が低くなり、精度の低下を招きます。
3. 焦点合わせのバラつきにより死細胞を見落とす（カウントし損ねる）ことに加え、青く染まった細胞と染まっていない細胞の判別が不正確になることにより、生存率が実際よりも高く測定されてしまいます。
4. 3次元の凝集体を平面（2D）の画像で正しく検出することはできません。氷山の一角のように、大部分の細胞を見落とすことになります。

フローサイトメトリーは複雑な表現型解析におけるゴールドスタンダードですが、以下のような壁があります。

• 価格とランニングコスト：高価な装置や色素、抗体が必要です。
• 手間：サンプルの前処理に時間を要します。
• 時間：共通利用機器室では順番待ちや事前予約が必要であるため、思い立った時すぐに測定することは困難です。
• 技術：専門知識や習熟が必要で、誰でも簡単に扱えるわけではありません。

CASY VIVOであれば、低いランニングコストで短時間、簡便にフローサイトメトリーとマッチする結果を得ることができます。

体積ベースの細胞サイズ分布からは、単にサイズだけでなく、より多くの情報が得られます。

• 細胞均質性の度合い
• 凝集の特定と定量化
• 培地中の異なる細胞種を区別
• 細胞の状態
• コンタミネーションに対する警告

• ユーザー管理 (3段階のユーザーレベル)
• 測定ごとの表示、複数測定結果の重ね合わせ解析、平均値の分析も可能
• テンプレート数は無制限
• 測定結果はデータベースで管理
• データの安全性
• 優れたレポートツール（カスタマイズ可能）
• メタデータ、プライマリデータへの簡単なアクセスとエクスポート
• ウィザードによるユーザーサポート（スタートアップやシャットダウンのガイドなど）
• アクティブディレクトリによるユーザー管理（オプション）
• 21 CFR Part 11に対応（オプション）