付着状態(接着状態)の細胞へのエレクトロポレーションによる遺伝子導入
NEPA21と付着細胞用脚付電極を組み合せることにより、マルチウェルディッシュ上で、付着状態(接着状態)の細胞に直接遺伝子導入が可能です。
神経細胞等の剥がせない細胞に最適!!
アプリケーション
培養皿上の接着細胞へのトランスフェクション
マウスE15胎仔の大脳皮質より調整後6日間培養した初代培養神経細胞に、付着状態でpCAGGS-EGFPプラスミドの遺伝子導入を試みた。
図A:4ウェルディッシュ(NUNC社)上で、CUY900-13-3-5(付着細胞用脚付電極 24ウェル・4ウェル用)を使用してエレクトロポレーション
図B:エレクトロポレーション後、2日間培養した神経細胞のEGFP抗体染色画像
図C:図Bの拡大写真 初代培養神経細胞(接着状態)に高い導入効率でGFPが発現している。
図D:図Cの拡大写真(40倍) 神経突起がよく観察できる。
独立行政法人 国立精神・神経医療研究センター 神経研究所 代謝研究部 提供
付着状態での細胞別遺伝子導入結果一覧
細胞名をクリック頂きますと、細胞の写真がご覧頂けます。
細胞名 | 生存率 | 導入 効率 | 細胞名 | 生存率 | 導入 効率 | |
プライマリー ヒト皮膚線維芽細胞 | 100% | 50% | 99% | 75% | ||
プライマリー マウス海馬神経細胞 E14胎児 EP:培養4日目 | 60% | 50% | プライマリー マウス海馬神経細胞 E18胎児 EP:培養2日目 | 85% | 54% | |
マウス神経幹細胞 | 71% | 50% | プライマリー マウスミクログリア細胞 EP:アストロサイトと1週間共培養後、1日目 | 80% | 73% | |
プライマリー マウスグリア細胞 EP:培養14日目 | 80% | 50% | プライマリー マウスストローマ細胞 EP:培養1ヵ月 | 90% | 50% | |
プライマリー マウス肝細胞 siRNAノックダウン | 良好 | 89% | プライマリー ラット大脳皮質神経細胞 E17胎児 EP:培養2日目 | 70% | 60% | |
プライマリー ラット海馬神経細胞 P7新生児 EP:培養11日目 | 100% | 50% | プライマリー ラット顆粒膜細胞 | 良好 | 41% | |
hMSC ヒト間葉系幹細胞 | 70% | 65% | SH-SY5Y ヒト神経芽細胞腫 | 90% | 50% | |
EPC ヒト血管内皮前駆細胞 | HPDE ヒト膵管上皮細胞 | 80% | ||||
THP-1 ヒト単球性白血病細胞 | 90% | 45% | C2C12 マウス骨格筋細胞 | 94% | 60% | |
3T3-L1 マウス脂肪細胞 分化7日目 | 90% | 70% | MEF マウス胎児線維芽細胞 | 60% | 80% | |
Neuro-2a マウス神経芽細胞腫 | 80% | 90% | C6 ラットグリオーマ細胞 | 57% | 55% |
文献
エレクトロポレーション
■ 培養細胞
- 初代培養細胞
- iPS細胞・ES細胞・幹細胞
- オルガノイド
- 株化細胞
- 培養細胞(NEPA Porator)
- 付着状態の細胞
■ In Vivo マウス・ラット
- 受精卵(TAKE法)
- 受精卵(i-GONAD/r-GONAD法)
- In Utero胎児
- Ex Utero培養胚
- 脳・脳切片・培養脳組織
- 網膜・角膜・脊髄・坐骨神経
- 肺・脾臓・肝臓・腎臓・胃・腸
- 膵臓・ランゲルハンス島
- 精巣・卵巣・前立腺・生殖腺・子宮
- 筋肉・皮膚・関節・軟骨・腫瘍・その他
■ In Vivo その他の動物
- ウシ・ブタ・その他の動物の受精卵
- ハムスターi-GONAD法
- サル皮膚
- ニワトリ(In Ovo・その他)
- ゼブラフィッシュ・その他の魚
- 昆虫・その他
■ 植物細胞・藻類
- 植物細胞
- 藻類
■ エクソソーム
- エクソソーム
■ バクテリア・酵母・菌類
- 大腸菌・バクテリア(細菌)
- 酵母・菌類
- 大腸菌・バクテリア・酵母・菌類(NEPA Porator)
ドラッグデリバリー・遺伝子導入
■ ナノ粒子作製
- 概要
- 脂質ナノ粒子(LNPs)
- 脂質ナノ粒子 (LNPs) のスケールアップ
- リポソーム
- ポリマーナノ粒子
- T細胞への遺伝子導入
- 造血幹細胞への遺伝子導入
■ 超音波(ソノポレーション・FUS)
- 遺伝子導入の概要
- 脳
- 肝臓・皮膚・その他
- 心臓
- 培養細胞
- 肺
- 筋肉
■ ジェットインジェクション
- マウス・ラットの皮膚
■ パーティクルデリバリー
- 植物
- 動物
■ マイクロインジェクション
- 植物細胞
電気式細胞融合
■ ハイブリドーマ作製
- モノクローナル抗体産生など
■ 卵子活性化
- 顕微授精(ICSI)の前・後の電気刺激など
■ 体細胞核移植
- クローン動物の作製
■ 四倍体胚の作出
- テトラプロイドキメラの作製など
■ その他
- リポソーム・プロトプラスト・酵母など
蛍光組織染色・in situ HCR
■ 蛍光組織染色
- 蛍光組織染色
■ in situ HCR
- Hybridization Chain Reaction
細胞分離
■ 幹細胞分取
- 幹細胞の分取・回収
- VIVANT-CELL®-Pot
1細胞回収・マイクロダイセクション
細胞凍結
細胞・微生物培養 (解析/計数/伸展/灌流)
■ 微生物ライブイメージング・解析
- 薬剤感受性試験
- 食品微生物学
■ リアルタイム細胞解析
- 細胞増殖
- 細胞遊走・創傷治癒
- 細胞毒性
- 細胞バリア機能
- 細胞変性(ウイルス学)
■ 細胞計数分析
- 株化細胞
- 幹細胞
- 初代培養細胞
- バクテリア
- 酵母
- 藻類・原虫
- 血液関連細胞
- その他
- 実験例:細胞毒性評価
- 実験例:藻類摂食率測定
■ 細胞伸展培養
- メカノトランスダクション
- 遺伝子発現
- 細胞接着
- 伸展活性化チャネル
- ナノマテリアル
■ 細胞灌流培養
- 加圧培養
- 薬剤応答
- 細胞分化・長期
- 蛍光観察
In vivo 超音波イメージング
卵振動培養
■ 卵子・胚盤胞
- 単為発生卵子および体細胞核移植胚 に由来する胚盤胞の効率的生産